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Polymerase chain reaction (PCR)
La réaction en chaîne de la polymérase (PCR) est une technologie en biologie moléculaire utilisée pour amplifier une seule copie ou quelques copies d'un morceau d'ADN sur plusieurs ordres de grandeur, générant ainsi des milliers à des millions de copies d'une séquence d'ADN particulière.
La méthode repose sur le cyclage thermique, consistant en des cycles de chauffage et de refroidissement répétés de la réaction pour la fusion de l'ADN et la réplication enzymatique de l'ADN. Les amorces (de courts fragments d'ADN) contenant des séquences complémentaires à la région cible ainsi qu'une ADN polymérase, qui donne son nom à la méthode, sont des composants clés pour permettre une amplification sélective et répétée.
Au fur et à mesure que la PCR progresse, l'ADN généré est lui-même utilisé comme modèle pour la réplication, mettant en marche une réaction en chaîne dans laquelle le modèle d'ADN est amplifié de manière exponentielle. La PCR peut être largement modifiée pour effectuer une large gamme de manipulations génétiques.
Tests basés sur la réaction en chaîne de la polymérase au R.E.D. Laboratories
Les PCRs disponibles peuvent être réalisées sur du sang, des liquides biologiques (liquide céphalorachidien, salive, prélèvements vaginaux, etc.), des biopsies (intestinale, cutanée, etc.), des tiques, etc.
R.E.D Laboratories ont développé une gamme de tests basés sur la PCR (à la fois PCRS conventionnelles et qPCR en temps réel) pour soutenir les tests d'infection chronique. Tous les fragments amplifiés sont soumis à un séquençage afin de confirmer la réelle positivité de l'échantillon (c'est-à-dire éviter les résultats faussement positifs).
Actuellement disponibles Tests PCR pour les infections bactériennes include: Mycoplasma spp, Mycoplasma fermentans, Mycoplasma pneumoniae, Bartonella, Brucella, Coxiella, Babesia, Anaplasma, Ehrlichia, Chlamydias, Rickettsias, Midichloria mitochondrii, etc.
Actuellement disponibles Tests PCR pour les infections virales include: Herpesviruses like HHV-6, HHV-7, HHV-8, Parvovirus, EBV, Cytomegalovirus, West Nile virus, Coxsackie virus.
Les scientifiques des laboratoires R.E.D. ont également développé une gamme de qPCRs en temps réel pour la quantification des ARNm de cytokines et de marqueurs liés à l'immunité, tels que l'élastase, la perforine, le panel de cytokines Th1/Th2, le panel de cytokines pro-inflammatoires, etc.
Les PCRs sont également utilisées pour les tests de génotypage.
